Studie Myeloperoxidase-Färbung verbessert die Diagnose von Blutkrankheiten

Myeloperoxidase (MPO) Färbung, auch bekannt als Leukozytenperoxidase (POX) Färbung, ist eine weit verbreitete zytochemische Färbungsmethode.Diese Technik erkennt die intrazelluläre Peroxidase-Aktivität, um bei der Diagnose von hämatologischen Erkrankungen zu helfen., insbesondere in der Leukämie-Klassifizierung.

MPO-Färbung beruht auf der katalytischen Reaktion der intrazellulären Peroxidase, die Oxide zersetzt, um Sauerstoff zu produzieren, der dann mit Kaliumjodid reagiert und Jod bildet.Das Jod verbindet sich mit Wright-Giemsa-Färbemittel, wodurch farbige Granulate im Zytoplasma entstehen, die die Peroxidaseverteilung unter dem Mikroskop aufzeigen.so dass MPO-Färbung zwischen ihnen unterscheidet.

Für die Standardfarbung von MPO sind spezielle Reagenzkits erforderlich, um die Genauigkeit und Zuverlässigkeit zu gewährleisten.

• Lösung A: Eosinlösung- Ein saurer Farbstoff, der das Zytoplasma rot oder rosa färbt
• Lösung B: Azure II- Ein Grundfarbstoff, der den Kern blau oder lila färbt
• Lösung C: PBS-Puffer aus Kaliumjodid- enthält das Peroxidase-Reaktionssubstrat und hält den pH-Wert stabil
• Lösung D: Wright-Giemsa-Flecken- Eine doppelte Farbe, die die Zellmorphologie verbessert.

Kits sind in verschiedenen Größen (5-Test-, 20-Test- und 100-Test-Konfigurationen) erhältlich, um unterschiedlichen Laborbedürfnissen gerecht zu werden.

1. Vorbereitung der Arbeitslösung: Mischen Sie Lösung C mit Lösung D (normalerweise 1,0 ml:250 μl Verhältnis).
2. Schmierebindung: Bereitgestellte Knochenmark- oder Blutabstriche mit Methanol oder Ethanol für 5-10 Minuten fixieren.
3. Färbung: Feste Schmierstoffe werden 5-10 Minuten lang in eine Arbeitslösung eingetaucht, wobei Temperatur und Luftfeuchtigkeit kontrolliert werden.
4. Spülen: Waschen Sie vorsichtig mit destilliertem Wasser oder PBS-Puffer, um überschüssige Flecken zu entfernen.
5. Gegenfärbung(optional): Verwenden Sie Hämatoxylin, um den Kernkontrast zu erhöhen.
6. Trocknen: Lufttrocknen oder mit einem Trockner.
7. Mikroskopie: Die Farbspuren werden untersucht, um die Peroxidaseaktivität und -verteilung zu ermitteln.

Die Interpretation der Ergebnisse erfordert spezielle Fachkenntnisse.

• Positive Reaktion: rotbraune bis dunkelblaue Zytoplasmagranulate (schwache vs. starke Positivität).
• Negative Reaktion: Blaues Zytoplasma ohne Granulate und gleichmäßig lila-rote Zellen.
• Eosinophile: Zeigen eine intensive dunkelblaue Färbung, manchmal mit extrazellulären nadelförmigen Kristallen.

• Klassifizierung der Leukämie: Unterscheidet myeloide (MPO-positive) von lymphatische (MPO-negative) Leukämie und leitet die Behandlungsentscheidungen.
• Diagnose einer akuten myeloiden Leukämie (AML): Bestätigt die myeloide Herkunft und unterstützt die Subtyping, wobei unterschiedliche Positivitätsraten auf verschiedene AML-Subtypen hinweisen.
• Bewertung des myelodysplastischen Syndroms (MDS): Bewertet zelluläre Reifung und Differenzierung mit abnormalen MPO-Mustern, die auf MDS hindeuten.
• Andere hämatologische Erkrankungen: nützlich bei der Diagnose von chronischer myeloider Leukämie und Myelofibrose.

• Reagenzqualität und Lagerbedingungen
• Strenge Einhaltung des Protokolls
• Richtige Zubereitung des Schmiers
• Optimale Farbdauer
• Experten-mikroskopische Auswertung durch Pathologen

Immunhistochemie kombiniert nun MPO mit Immunmarkern für eine größere Präzision, während Flow-Zytometrie eine quantitative MPO-Detektion ermöglicht.Da sich diese klassische zytochemische Methode entwickelt, verspricht, einen noch größeren Beitrag zur hematologischen Diagnose und Behandlung zu leisten.